本研究根据家兔卵巢的发育特征初步探讨了家兔卵巢卵母细胞体外发育的培养体系。采集新生或30日龄家兔卵巢在不同培养液中培养,并分析家兔卵母细胞的体外发生与成熟情况与体内正常发育的兔卵巢卵母细胞之间的差异,来筛选和优化家兔卵巢卵母细胞的体外培养体系。本试验从高糖DMEM、FSH浓度、BSA/血清等3个方面来筛选较好的培养条件,结果表明:①不添加高糖DMEM的M199培养液与添加的相比,卵巢上卵母细胞数量要多,但随着培养时间的延长,组织块上卵母细胞的形态会变得不清楚;②家兔卵巢组织在FSH浓度为50和100m IU/m l、添加血清的DMEM/F12培养液中生长较好,体外培养24d后,卵母细胞数量多,直径增加到65μm;③与添加BSA的培养液相比,添加血清的培养液中的卵巢卵母细胞生长状态较好,体外培养28d后,卵母细胞数量多,并且直径可达65μm。
为了分析中国家驴的遗传多样性,对保种和开发利用这一固有遗传资源提供有益帮助,并对其母性起源提供一些基础资料,作者对我国4个家驴品种(德州、凉州、云南、蒙古)209个个体的mtDNAND4基因编码区409bp片段进行了扩增、单链构象多态(SSCP)检测与测序分析,共检测到5种单倍型8个多态位点,其单倍型多样度为0.4699,核苷酸多样度为0.00308,表明我国家驴的遗传多态性比较丰富。通过对各单倍型序列按照脊椎动物线粒体编码规则翻译成氨基酸序列进行比对发现,部分核苷酸变异引起了氨基酸的变异。构建的简化加权中值网络聚类图显示,4个家驴品种的样品来自两个母系源头,并且,4个中国家驴品种都是由这两个母性世系混杂而成的,即未发现由同一种世系构成的品种。这与以前基于D-loop区序列对于中国家驴的研究结果相似,即地理位置、世系构成以及母性起源之间没有明显的相互关系。
在大田条件下设4个处理:传统耕作(CT)、还田免耕(NT1)、整秆覆盖免耕(NT2)、还田深松免耕(NTS),研究了保护性耕作模式对冬小麦产量及土壤理化性状的影响。结果表明,小麦返青后,保护性耕作0~20 cm土壤容重低于传统处理,有机质含量、速效氮、速效钾和速效磷含量高于传统处理,但20~40 cm土壤养分各项指标除NTS表现与0~20 cm相同趋势外,NT1和NT2有减小趋势。保护性耕作最终提高了小麦穗粒数和千粒重,但降低了公顷穗数,比传统耕作减少240万/hm2,产量表现:NTS>CT>NT2>NT1。表明,土壤深松技术与秸秆还田相结合,能有效改善和提高土壤耕层和耕层以下土壤理化性状,发挥保护性耕作的增产潜力。
采用"3414"肥料试验,探索花生间作大葱条件下氮磷钾配施效应,经过肥料效应函数拟合,研究了氮磷钾肥不同比例配合施用对花生间作大葱产量的影响,研究结果表明:氮磷钾肥配施能显著提高大葱产量,在一定范围内随着施氮量的增加大葱的产量升高,各施肥处理产量比不施肥处理增产5.50%~82.00%;同时,氮磷钾肥配施能够显著提高花生产量,各施肥处理产量较不施肥处理增产22.83%~48.73%,氮磷钾3种肥料对花生产量的效应函数拟合性较好。综合3类7种肥料效应函数,在花生间作大葱条件下高产推荐施肥量为:N 157.2kg/hm2、P2O5143.1kg/hm2、K2O 125.8kg/hm2,肥料用量比例为N:P2O5:K2O是1.25:1.14:1。
在大田条件下研究了不同多穗型小麦旗叶光合色素含量、叶片抗衰老酶活性及籽粒灌浆参数的差异,为小麦的高产超高产栽培提供一定的理论依据。结果表明,不同多穗型小麦品种叶绿素a含量和叶绿素b含量差异显著,类胡萝卜素含量差异不明显。不同多穗型小麦产量差异显著,烟农24、烟农22、烟2415、烟农21产量分别比鲁麦21提高19.3%、12.6%、12.5%、8.1%。各基因型小麦穗粒数差异不明显。不同基因型小麦SOD、POD、CAT活性差异显著。烟农24 SOD活性较高,烟农21 POD活性最高,烟农22 CAT活性最高。
通过对亩产700kg超高产麦田连续多年多点跟踪调查分析研究,得出了在青岛市气象和生产条件下,实现亩产700kg超高产栽培的土壤肥力指标为有机质1.4%以上,碱解氮90mg/kg以上,速效磷35mg/kg以上,速效钾100mg/kg以上;施肥指标为有机肥3000kg/667m2,纯N 20kg/667m2,P2O510kg/667m2,K2O 10kg/667m2左右。产量构成因素指标为穗数54.2万/667m2,穗粒数35.7粒,千粒重43g;群体动态指标为基本苗13.8×104/667m2,冬前总茎数75.1×104/667m2,春季最大分蘖107.5×104/667m2左右。
以江苏沿江地区农业科学研究所培育的3个自交系及其导入热带种质"320"的3个改良系为被测系,以5个外引系为测验种,按NCⅡ设计配制30个组合,分析10个农艺性状的配合力。结果表明:热带种质"320"的导入对株高、穗位高的一般配合力表现出显著的正效应,对其他农艺性状一般配合力的效应由于受体的自交系不同,表现并不一致,甚至对某些优良自交系的有益农艺性状呈负效应;导入"320"的4S1、751、2491分别与齐319、齐318、丹340在单株产量上具有较高的特殊配合力效应值,值得进一步深入研究。
本研究利用RAPD和SSR分子标记技术,对11个无花果(Ficus carica)品种进行了分析。结果表明,28条RAPD随机引物可以有效鉴别出其中3个品种,其余8个品种可被归为3组;其中,引物S1259的鉴别效率最高。另外,8对来自无花果基因组的SSR引物分析表明,引物对MFC1和MFC4均能直接鉴定出其中的2个品种。将其扩增结果结合分析,得到了与RAPD分析相似的鉴定结果。
以7个苹果品种为试材,比较了苹果浓缩汁在两种温度下贮藏稳定性的评价方法。方法1为将苹果浓缩汁在25℃恒温条件下贮藏60d;方法2为在37℃恒温条件下贮藏7d。根据浓缩汁贮藏前后A420、T625、DB、DE的变化量来评价其稳定性。结果表明:两种方法对7个苹果品种浓缩汁贮藏稳定性的评价结果有一定的差异。对两种方法的应用进行了讨论。
以重组质粒pBAD-LRCP-126为模板,经PCR扩增获得了PLRV缺失突变CP基因的特异性条带。目的片段与pYES2.1/V5-His/-TOPO的连接产物转化大肠杆菌TOP10F′获得了氨苄青霉素抗性菌落,酶切与DNA测序结果确认了酵母表达载体的正确性,该表达载体命名为pYES-LRCP-126。在30℃,酿酒酵母工程菌株INVSc1(pYES-LRCP-126)经2%半乳糖诱导培养16h,SDS-PAGE显示蛋白图谱上有一条23kDa的诱导表达的蛋白条带,其大小与预期的重组CP大小相符,表明PLRV缺失突变基因在酵母菌中实现了表达。
目前,在水稻中已克隆出GA受体GID1基因,其功能丧失会导致植株矮化。同时,在拟南芥中也克隆出3个相关的GA受体基因。根据它们氨基酸序列的保守区设计简并引物,在不同作物中进行扩增。扩增产物进行回收及测序,根据这些片段的序列从数据库中得到对应的EST序列和氨基酸序列。结果表明:水稻与高粱、小麦、玉米(GID1A和GID1B)和棉花中GA受体的氨基酸序列具有较高的同源性,分别为81.44%、81.36%、80.50%、79.14%和63.13%。
以玉米耐盐性品种"登海6213"和盐敏感品种"鲁单50"为材料,分别以0.001~10 mmol/L的VB1、VB5、VB6和VC浸种24h,将浸泡过的种子分别置于蒸馏水和150mmol/L的NaCl溶液中进行暗萌发,观测种子的发芽率。结果表明1mmol/L的VB1能够有效缓解盐胁迫对种子萌发的抑制作用,而1mmol/L的VB5对正常条件下的种子萌发的促进效果最佳。用1mmol/L的VB1浸种,均能提高两个品种的α,β-淀粉酶活性和可溶性糖含量。
以萌动1d的半片大豆种子为试验材料,用复合针针刺2次,农杆菌LBA4404/pCAMBIA1201侵染,共培养3d,GUS染色检测瞬时表达效率。结果表明:不同基因型和乙酰丁香酮(As)浓度对转化效率有显著影响,As浓度为100或200μmol/L时,转化效率显著提高,其中以合丰25的转化效率最高,平均为8.6个蓝色斑点;农杆菌的侵染时间以30 min为宜;农杆菌的侵染浓度以OD600为0.6时最佳,平均为9.8个蓝色斑点。
三疣梭子蟹是大型可食经济蟹类,具有很高的商业价值。为发展三疣梭子蟹育苗技术,试验对其早期发育阶段的饵料选择、投喂策略及最佳捕食密度进行了探讨。实验设置小球藻组、扁藻组、小球藻与扁藻混合组、轮虫组(加小球藻50×104个/ml)和卤虫组(加扁藻8×104个/ml)5个因素,分别设4、4、4、6和6个梯度。结果表明,小球藻浓度50×104个/ml或扁藻浓度8×104个/ml或小球藻(25~40×104个/ml)+扁藻(2.5~4×104个/ml)可使Ⅰ期溞状幼体(Z1)存活较长时间,但仅投喂单胞藻类不能使Z1正常变态;自Z1开始投喂轮虫可使幼体正常发育至Ⅲ期溞状幼体(Z3),以后幼体发育迟缓,出现Ⅲ期、Ⅳ期溞状幼体(Z4)和大眼幼体(M)同时存在的现象。Z1对轮虫的最佳捕食密度为5个/幼体、Ⅱ期溞状幼体(Z2)为10个/幼体,存活率可分别达到95.7%和94%;从Z3开始应该投喂卤虫无节幼体,捕食密度为10个/幼体,存活率达到最高值为84.5%。从Z4开始投喂卤虫成体,Z4、M和Ⅰ期幼蟹(C)的最佳捕食密度为10个/幼体,存活率分别为90%、85.7%和82.9%。因此,三疣梭子蟹Z1和Z2应该投喂轮虫,最佳捕食密度分别为5个/幼体和10个/幼体;Z3开始投喂卤虫无节幼体,最佳捕食密度为10个/幼体。Z4开始投喂卤虫成体,最佳捕食密度为10个/幼体。同时,育苗水体中添加一定量的单胞藻类。
以石鲽(Kareius bicoloratus)为试验材料研究探讨其外周血细胞培养及染色体制备的条件方法。用RPMI1640全血培养基进行培养,从血液保存时间、刺激源PHA(植物血球凝集素)和ConA(刀豆蛋白A)等方面对外周血淋巴细胞的培养及其染色体制备条件进行探讨,建立较成熟的石鲽外周血淋巴细胞培养及染色体制备的方法。结果表明:血液于4℃保存3d后用全血培养基进行培养,细胞仍可正常生长;在16℃培养温度下,ConA和PHA两种刺激源均能促进石鲽外周血淋巴细胞的分裂增殖,培养时间以72h最好;从培养的血细胞形态和白细胞数目来看,以ConA为刺激源的作用效果好于以PHA为刺激源的作用效果;5ml培养基中加入0.2ml全血,16℃下用终浓度为0.1mg/ml的ConA为刺激源培养72h,在结束培养前4h加入终浓度0.6μg/ml秋水仙素,0.075mol/L的氯化钾低渗35min可获得较好的染色体分裂相。
采用静态顶空(SHS)和气相色谱-质谱联用(GC-MS)技术,分析了富士苹果0℃贮藏过程中香气成分的变化。结果表明:①套袋导致富士苹果采收时香气物质相对百分含量降低。套双层袋富士苹果采收时香气物质相对百分含量平均为85.53%,而不套袋的对照为92.19%;②0℃贮藏下随着时间的延长,套袋和不套袋富士苹果果实香气物质的相对百分含量均比采收时升高,但两种纸袋间差异不显著。贮藏60d时套袋果实香气物质的相对百分含量上升为94.79%,不套袋果实为98.02%,贮藏120d时套袋果实香气物质的相对百分含量上升为97.8%,不套袋的果实为98.05%;③0℃贮藏过程中套袋和不套袋果实香气物质的种类均呈先升高后降低的趋势;④采收和贮藏过程中,套袋果实的酯类、醇类物质相对百分含量明显低于对照。
以川楝子为原料,采用超声波法提取其中的黄酮类化合物,通过正交实验研究其最佳的提取工艺。研究结果表明,超声波法提取川楝子黄酮的最佳工艺为乙醇浓度50%、液料比1:40、超声波提取时间40min、温度80℃,黄酮得率为0.561%,明显高于相同条件下传统水浴提取法的得率0.294%,和在相同乙醇浓度、料液比、提取温度条件下微波法的得率0.278%,研究结果为川楝子的综合开发利用提供了理论依据。
利用成都钢管厂浇铸管坯后的浸入式水口,采用扫描电镜和χ-射线衍射分析浇铸后水口结瘤物的微观组织结构,从结瘤物的生成和黏附过程两方面对铝碳质复合浸入式水口浇铸管坯时水口结瘤物附着机理进行了探讨。
本文分析了交通信号灯的控制要求,利用三菱FX系列的PLC与上位计算机工控组态软件组态王实现了交通信号灯控制系统的设计。本设计综合了计算机和PLC的长处,为交通信号灯监控的远程化,区域化,网络化研究打下基础。
以HT46R47单片机为控制核心,研制了一种新型电采暖炉控制器。该控制器采用液晶面板显示有关信息,键盘或遥控器设置参数,通过电热管和静音水泵实现水温控制和热水循环,并设有双重漏电保护和防干烧保护。采用该控制器的采暖炉安全可靠、智能化程度高、采暖效果好,具有较高的性价比和推广价值。
选用廉价、多孔、可再生的竹炭作为模板,结合溶胶-凝胶法成功地制备了纳米Co3O4。借助X-射线衍射(XRD)测试以及透射电镜(TEM)测试对所制备的纳米材料的晶型和形貌大小进行了表征。测试结果表明产物为球形立方相Co3O4,其平均直径为35nm左右。进一步通过循环伏安和恒流充放电测试研究了所得纳米Co3O4样品的电容器性能。测试结果表明,所得Co3O4电极在6mol/L KOH溶液中,-0.1~0.5V(vs Ag/AgCl)电位范围内,具有较好的循环稳定性,单电极的放电比容量达到了250F/g。
利用线扫极谱法研究了锌(Ⅱ)-邻菲啰啉(Phen)二元络合物与人血清白蛋白(HSA)的相互作用并建立了以Zn(Ⅱ)-Phen二元配合物为电化学探针测定HSA的分析测试方法。在最佳条件下,还原峰电流的降低值与人血清白蛋白的浓度2.0~20.0mg/L范围内呈线性关系,线性回归方程为ΔIp″(nA)=140.3C(mg/L)+1981.06(ni=16,γ=0.996),检测限为1.301mg/L(3σ)。应用该法测定了模拟样品和健康人血清样品中蛋白质的含量,结果令人满意。
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