通过持续皮下注射DHEA构建常规的多囊卵巢综合征(Polycystic Ovarian Syndrome,PCOS)母鼠模型,然后利用单细胞重亚硫酸盐测序技术和COBRA,首次检测了MII阶段的卵母细胞印记基因(包括H19、Rasgrf1、Snrpn、Peg1和Peg3)甲基化状态。结果显示,通过注射DHEA构建的模型鼠的血清中睾酮含量显著升高、排卵数量显著降低,并且MII时期的卵母细胞中H19、Rasgrf1、Snrpn、Peg1和Peg3这几个印记基因并没有显示出甲基化状态异常的状况。
胚胎生殖细胞(embryonic germ cells,EG)是来源于原始生殖细胞(primordial germ cells,PGC)的多潜能干细胞。本研究旨在优化昆明白小鼠EG细胞的培养条件。以昆明白小鼠10.5dpc胚胎PGC为材料,以丝裂霉素C处理的小鼠成纤维细胞(mouse embryonic germ cells,MEF)为饲养层,培养小鼠EG细胞,以对影响小鼠EG细胞传代的因素进行探讨。用ELISA试剂盒定量检测MEF自身分泌生长因子SCF、bFGF、LIF的浓度;以培养液是否添加生长因子,观察PGC/EG的培养效果;比较了机械分割法、胰酶消化法和胶原酶Ⅳ消化法对EG传代培养的影响;对获得的EG进行多能性鉴定。结果表明,培养3d的饲养层上清液中含75.7ng/L SCF、125.7ng/L bFGF、196.6ng/L LIF,培养5d的饲养层上清液中含76.2ng/L SCF、136.2ng/L bFGF、214.2ng/L LIF;培养液添加生长因子显著提高了EG的克隆数、传代数(P<0.05);机械分割法与酶消化法对EG传代差异显著(P<0.05),而两种酶法对EG传代无显著影响(P>0.05);所分离的EG细胞显示AKP染色强阳性;EG体外培养时会自分化为神经样细胞、上皮样细胞;EG细胞呈Oct4、SSEA-1的免疫荧光检测阳性。结果提示,饲养层自身能分泌少量生长因子,但培养液中添加生长因子可显著改善昆明白小鼠EG培养效果,酶消化法更适合于昆明白小鼠EG的传代培养。
本文采用培养皿滤纸法,初步测定了番茄茎叶水提取液对番茄、茄子、辣椒、黄瓜、白菜、油菜和花椰菜7种蔬菜的化感作用。结果表明,番茄茎叶水提液具有自毒作用,在0.005、0.01、0.02和0.04g·mL~(-1)浓度时均显著抑制种子萌发、根的生长,而对茎的生长表现低促高抑作用,在0.04g·mL~(-1)时显著抑制茎生长,抑制率达50.0%。在0.02g·mL~(-1)番茄茎叶水提液就可显著抑制7种蔬菜种子萌发;在0.005~0.04g·mL~(-1)时,显著促进辣椒、花椰菜幼苗茎的生长,显著抑制黄瓜幼苗茎的生长,对其他蔬菜幼苗茎的生长表现低促高抑浓度效应;在相同浓度范围内,显著抑制根的生长,但在0.005、0.01g·mL~(-1)时显著促进辣椒根生长,促进生长率分别达77.9%、49.0%。试验结果可为番茄地的连作、轮作、间作,以及以番茄茎叶为原料开发植物源除草剂提供试验参考。
丛枝菌根(AM)真菌、木霉(Trichodermaspp.)和根围促生细菌(PGPR)是重要的植物根系共生微生物。本试验于温室盆栽条件下研究了AM真菌摩西斗管囊霉Funneliformis mosseae、根内根孢囊霉Rhizophagus intraradices、哈茨木霉Trichoderma harzianum LTR-2和巨大芽孢杆菌Bacillus megaterium B130-1及其组合促进烟草(Nicotiana tabacum)品种CF90NF幼苗生长的效应及其作用机制。结果表明,供试组合均可促进烟草幼苗生长,以摩西斗管囊霉+哈茨木霉LTR-2组合作用最显著,摩西斗管囊霉+哈茨木霉LTR-2同时接种显著提高烟草植株总根长、根系总面积、根尖总数、根系活力以及叶片叶绿素含量、气孔导度和光合速率等指标,同时诱导叶片中生长素合成关键酶吲哚-3-乙酰胺水解酶基因NtAMI1表达上调,提高叶片吲哚乙酸(IAA)含量。结论认为,摩西斗管囊霉+哈茨木霉LTR-2组合可促进烟草根系生长,改善植株的光合性能,提高植株IAA含量,进而促进植株生长。
甘油醛-3-磷酸脱氢酶作为糖降解过程中重要的酶之一,在生物体的生命活动及非生物胁迫应答过程中发挥重要作用。本研究以耐盐碱能力极强的野生大豆‘G07256’为材料,采用同源克隆的方法获得了编码野生大豆甘油醛-3-磷酸脱氢酶的基因全长,并命名为GsGAPC,其CDS区为1023bp,编码340个氨基酸,是一个稳定蛋白,不具有跨膜结构域。通过蛋白二级结构及三级结构预测发现,该蛋白二级结构主要由α螺旋、β折叠、延伸链和无规则卷曲组成且三级结构复杂。进化树分析发现,野生大豆GsGAPC蛋白与大豆(G.max、NP_001240046.1)、绿豆(V.radiate、XP_014494377.1)、木豆(C.cajan、XP_020228078.1)、菜豆(P.vulgaris、XP_007163725.1)的同源性较近。蛋白保守结构域分析显示GsGAPC有3个保守结构域,N-端结构域,NAD结合结构域和C端甘油醛-3-磷酸脱氢酶亚家族结构域(Gp_dh_C superfamily)。实时荧光定量PCR分析发现GsGAPC在野生大豆的根、茎、叶、子叶中均表达,且在根中表达量最高;盐、ABA、MeJA处理后,GsGAPC在野生大豆的根中均上调表达;而在叶中,4种胁迫处理后GsGAPC均显著诱导表达。该结果暗示GsGAPC在野生大豆的根和叶中可能通过JA和ABA信号通路来响应盐碱胁迫。
为明确山东省水稻产地土壤环境质量与重金属污染风险,本研究从水稻主产区采集代表性农田稻田土壤,测定了Cd、Hg、As、Cr、Pb、Zn、Cu等重金属元素含量,采用单因子污染指数法、内梅罗综合污染指数法和Hakanson潜在生态风险指数法对土壤重金属污染水平及其潜在生态风险进行了评价。结果表明,山东省水稻主产区土壤中Cd、Hg、As、Cr、Pb、Zn和Cu的平均含量分别为0.25、0.06、9.48、102.7、34.0、111.3和29.3mg·kg-1,与该省土壤环境背景值相比,表现出不同程度积累特征;与《土壤环境质量标准》(GB 15618—1995)II级标准比较,Cd和Zn含量超标样点分别为14.6%和9.8%。相关分析表明,土壤Cd、Cu、Zn、As全量与土壤pH值呈显著正相关性,有效态Cd、Pb含量与pH、有效态Cu含量与有机质含量呈显著正相关性,而有效态Cr含量与有机质含量呈显著负相关性。单因子污染指数和内梅罗综合污染指数评价结果显示,山东稻田土壤绝大多数点位污染指数小于1,表现为未受污染状态;而Hakanson生态危害指数评价结果显示,山东省稻田土壤Cd和Hg含量达到较强的潜在生态危害水平。总体而言,山东省水稻主产区稻田土壤重金属含量较低,土壤环境质量良好,尚无污染危害,但Cd和Hg在土壤中积累表现出一定的潜在生态风险。
2016年9月和2017年6月对射阳河近海段的温度、浊度、盐度、叶绿素a、酸碱度、溶解氧(DO)、氨氮(NH_3-N)、总磷(TP)和高锰酸盐指数(COD_(Mn))进行监测分析。结果显示:不同时期温度相差不大,入海口浊度、盐度和TP浓度远高于上游,下游pH值和DO浓度高于上游,2016年9月NH3-N和COD_(Mn)浓度大于2017年6月。上游入境客水带来的有机污染影响较大,同时入海口在2016年9月有机污染较重,入海口富营养化水平也比上游高。2016年9月综合水质达到Ⅳ类标准,2017年6月达到Ⅲ类标准,盐淮高速断面和建新村断面综合水质较差,COD_(Mn)、DO和TP是主要污染物。相关性分析显示叶绿素a、DO和pH值三者正相关,TP、浊度和盐度均由人为活动导致,农业生产是NH_3-N和COD_(Mn)的主要来源。
土壤养分、重金属与pH是土壤基础生产力的重要组成部分,利用高光谱技术快速获得相关元素含量和pH大小在近几年得到关注。通过大沽河流域土壤高光谱实测数据,随机分组建立训练集和验证集,利用主成分分析(PCA)和支持向量机(SVM)建立土壤养分、重金属与pH的探测模型,其探测准确度与化学检测结果相比能达到较高的水平。其中氮(N)、磷(P)、钾(K)、有机质(OM,基本组成元素为碳、氢、氧)、镉(Cd)和pH的决定系数(R2值)分别为:0.78、0.81、0.85、0.86、0.74、0.93,汞(Hg)的决定系数较低,只有0.09;土壤粒径在60目下,探测结果最好;当土壤粒径大于60目时,探测的准确度有所下降;土壤压实比未压实处理探测准确度高。通过高光谱技术探测土壤各元素含量和pH大小具有检测精度高、速度快等特点,对精准农业快速发展具有重要意义。
为探讨高压静电场处理对香菇采后保鲜效果的影响,以新鲜香菇为试材,随机分成2组,其中1组进行高压静电场处理,另1组作为对照实验(CK),在温度为7±1℃的条件下贮藏并分析其感官品质及生理生化变化。结果表明:与CK组相比,高压静电场处理对香菇保鲜品质及生理代谢具有一定的影响。高压静电场处理能显著抑制香菇呼吸代谢强度及内源性甲醛含量的积累,延缓多糖和维生素C的降解,降低失重率(p<0.05),但对感官分值和可溶性固形物含量影响差异不显著(p>0.05)。表明适宜的高压静电场处理可在一定程度上改善香菇的采后保鲜品质。
研究了ZnSO_4胁迫下,外源喷施CaSO_4、CaCl_2和Ca(NO_3)_2对西兰花芽苗菜生长状况、抗氧化酶活力和萝卜硫苷代谢的影响。结果表明,西兰花芽苗菜在ZnSO_4胁迫下添加三种钙盐后芽长和呼吸速率显著增加,而电解质渗透率和MDA含量显著降低,表明三种钙盐可以缓解ZnSO_4对西兰花芽苗菜的胁迫抑制作用,尤其是Ca(NO_3)_2处理下芽苗最长。同时,超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化氢酶(CAT)活力也显著增强;CaCl_2和Ca(NO_3)_2处理下,过氧化物酶(POD)活力与对照无显著差异,CaSO_4处理下抗氧化酶活力相对较强。ZnSO_4胁迫下,喷施CaSO_4、CaCl_2和Ca(NO_3)_2显著提高了西兰花芽苗菜中萝卜硫苷和萝卜硫素含量,但黑芥子酶活力与对照无显著差异;尤其CaCl_2处理下萝卜硫苷和萝卜硫素含量相对更高。
乳酸菌(LAB)是一类能发酵糖类产生乳酸的革兰氏阳性细菌,大部分能够抑制腐败菌生长。以从泡菜、发酵乳及火腿等原料中分离筛选到的乳酸菌为研究对象,研究其发酵上清液对铜绿假单胞菌的抑菌效果。探讨了不同酶、初始培养pH、NaCl浓度和培养时间对乳酸菌素抑菌活性的影响,研究了乳酸菌素的热稳定性及最小抑菌浓度。结果表明:菌株Zd产生的乳酸菌素具有最好的热稳定性,并在初始pH为5,添加4%NaCl的环境下培养24h时具有最佳抑菌活性。
设计中草药配方,分别以0.5%、1%、2%添加到基础饲料中,连续饲喂大鳞鲃2个月后,测定鱼体相对增长率,胃和肝胰脏消化酶活力,血清溶菌酶及超氧化物歧化酶活力。研究结果表明:0.5%添加中草药对大鳞鲃胃蛋白酶活力的影响显著,鱼体相对增长率为79.03%,比对照组(68.53%)高10.5%,显著高于对照组(P<0.05)。1%、2%添加中草药未能提高鱼体相对增长率,且2%组胰蛋白酶、胰淀粉酶活力显著低于对照组,一方面是因为添加剂量过大反而产生毒副作用,另一方面是因为试验所用鱼规格较小,器官系统结构、功能尚不完善,不能充分利用中草药的有效成分,中草药添加量大了反而效果不佳。因此适宜剂量的中草药添加剂(本试验中为0.5%),能提高大鳞鲃胃蛋白酶活力,促进鱼体生长。
常规的热湿耦合处理空调系统由于所需的除湿温度低,导致制冷效率低、冷热抵消、自然冷源无法应用以及室内空气品质较差等问题。热泵驱动的新型溶液除湿空调系统就是在这一背景下提出来的,它具有运行稳定、高效节能等优点,是未来理想空调的一个新的发展方向。这种新型溶液除湿空调系统,利用冷凝器释放的冷凝热作为稀溶液再生热源。利用双冷凝器并联运行,并结合空气源或水源等冷热源方式实现制冷系统的热量平衡,充分发挥常规冷凝温度制冷循环在制冷能效方面的优势。对青岛一座四层综合楼的能耗计算表明,基于热泵驱动的新型溶液除湿空调系统比常规热湿耦合处理空调系统节能约22.2%。